Edvotek kit 1115.
Påvisning av Alzheimers risikofaktorer ved bruk av Western Blot
Hensikt:
Formålet med dette eksperimentet er å gi studentene innsikt i og prøve western blotting. Med western blotting må studentene bestemme risikoen for deltakere i en simulert studie som utvikler Alzheimers.
Det eksperimentelle scenariet er at en forskningsgruppe har funnet et stoff som stopper utviklingen av Alzheimers hos mus. Det neste trinnet er å få tillatelse til å teste stoffet på mennesker. For å utføre en kontrollert studie er det viktig å ha to like grupper av personer med uttrykt ApoE4, med en gruppe som mottar det nye stoffet og den andre gruppen som får placebo.
Kort om prosedyren:
Først skilles de forskjellige proteinene på en polyakrylamidgel ved vertikal elektroforese, deretter overføres proteinene fra polyakrylamidgelen til en ladet nylonmembran og deretter farges eller analyseres proteinene ved immunokjemiske metoder.
Spørsmål / diskusjon:
1. Hva er Alzheimers sykdom?
2. Hvilke faktorer påvirker om du får sykdommen?
3. Hvorfor er det vanskelig å utvikle medisiner mot Alzheimer?
4. Hvorfor er det nødvendig å gjøre en Western Blot for å finne ApoE -allelen?
Materialer: 6 grupper (2 grupper per gel)
Forsøkstid:
Modul I 90 min
Modul II 15 min + over natten
Modul III 180 min
Utstyrskrav:
• 12 % polyakrylamidgeler (1 pakke med 3)
• Vertikal gelelektroforeseapparat og strømforsyning
• Ristebord / vippebord
• Pipetter og mikropipetter
• Mikrosentrifugerør
• Begerglass
• 1 ml pipetter
• Målebeger
• Plastfolie
• Sakser
• Kar
• Pinsett
• Papirservietter
• Latex/vinylhansker
• Sikkerhetsbriller
• Metanol
